有些微生物是有益的,也有些微生物的存在可引起多種應(yīng)變性疾病和傳染性疾病,會(huì)對(duì)人身體健康產(chǎn)生不良的影響;還會(huì)使食品及原料腐爛和變質(zhì)。所以,微生物檢測(cè)必須嚴(yán)格把關(guān)。
微生物檢測(cè)的必要性
1、食品
食品因含有微生物可依賴生長的營養(yǎng)成分,因此食品會(huì)受到微生物不同程度的污染。食品質(zhì)量安全關(guān)系到人民群眾的身體健康,生命安全及社會(huì)經(jīng)濟(jì)。為了食品的安全,人們的健康,微生物檢測(cè)極其必要。
2、醫(yī)院
醫(yī)院感染都和微生物有著極為密切的關(guān)系。加強(qiáng)醫(yī)院的微生物檢驗(yàn)與監(jiān)測(cè),對(duì)于預(yù)防和控制醫(yī)院感染起著十分重要的作用。
3、空氣
室內(nèi)空氣是微生物污染的重要傳播途徑。室內(nèi)舒適的溫度,濕度等環(huán)境條件以及相對(duì)密閉的室內(nèi)更為各種有害微生物滋生創(chuàng)造了條件。只有有效地檢測(cè)微生物的含量,才能采取有效地措施,才能保證人體健康不受微生物的危害。
微生物檢測(cè)方法
1、計(jì)數(shù)器測(cè)定法
即用血細(xì)胞計(jì)數(shù)器進(jìn)行計(jì)數(shù)。取一定體積的樣品細(xì)胞懸液置于血細(xì)胞計(jì)數(shù)器的計(jì)數(shù)室內(nèi),用顯微鏡觀察計(jì)數(shù)。由于計(jì)數(shù)室的容積是一定的(0.1mm3),因而根據(jù)計(jì)數(shù)器刻度內(nèi)的細(xì)菌數(shù),可計(jì)算樣品中的含菌數(shù)。本法簡(jiǎn)便易行,可立即得出結(jié)果,不僅適于細(xì)菌計(jì)數(shù),也適用于酵母菌及霉菌孢子計(jì)數(shù)。
2、電子計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù)法
電子計(jì)數(shù)器的工作原理是測(cè)定小孔中液體的電阻變化,小孔僅能通過一個(gè)細(xì)胞,當(dāng)一個(gè)細(xì)胞通過這個(gè)小孔時(shí),電阻明顯增加,形成一個(gè)脈沖,自動(dòng)記錄在電子記錄裝置上。該法測(cè)定結(jié)果較準(zhǔn)確,但它只識(shí)別顆粒大小,而不能區(qū)分是否為細(xì)菌。因此,要求菌懸液中不含任何碎片。
3、活細(xì)胞計(jì)數(shù)法
常用的有平板菌落計(jì)數(shù)法,是根據(jù)每個(gè)活的細(xì)菌能長出一個(gè)菌落的原理設(shè)計(jì)的。取一定容量的菌懸液,作一系列的倍比稀釋,然后將定量的稀釋液進(jìn)行平板培養(yǎng),根據(jù)培養(yǎng)出的菌落數(shù),可算出活菌數(shù)。此法靈敏度高,是一種檢測(cè)污染活菌數(shù)的方法,也是目前國際上許多國家所采用的方法。使用該法應(yīng)注意:
①一般選取菌落數(shù)在30~300之間的平板進(jìn)行計(jì)數(shù),過多或過少均不準(zhǔn)確;
?、跒榱朔乐咕渎樱绊懹?jì)數(shù),可在培養(yǎng)基中加入0.001%的2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC);
③本法限用于形成菌落的微生物。廣泛應(yīng)用于水、牛奶、食物、藥品等各種材料的細(xì)菌檢驗(yàn),是Z常用的微生物檢測(cè)方法。
4、比濁法
比濁法是根據(jù)菌懸液的透光量間接地測(cè)定細(xì)菌的數(shù)量。細(xì)菌懸浮液的濃度在一定范圍內(nèi)與透光度成反比,與光密度成正比,所以,可用光電比色計(jì)測(cè)定菌液,用光密度(OD值)表示樣品菌液濃度。此法簡(jiǎn)便快捷,但只能檢測(cè)含有大量細(xì)菌的懸浮液,得出相對(duì)的細(xì)菌數(shù)目,對(duì)顏色太深的樣品,不能用此法測(cè)定。
5、測(cè)定細(xì)胞重量法
此法分為濕重法和干重法。濕重法系單位體積培養(yǎng)物經(jīng)離心后將濕菌體進(jìn)行稱重;干重法系單位體積培養(yǎng)物經(jīng)離心后,以清水洗凈放人干燥器加熱烘干,使之失去水分然后稱重。此法適于菌體濃度較高的樣品,是微生物檢測(cè)的一種常用方法。
6、測(cè)定細(xì)胞總氮量或總碳量
氮、碳是細(xì)胞的主要成分,含量較穩(wěn)定,測(cè)定氮、碳的含量可以推知細(xì)胞的質(zhì)量。此法適于濃度較高的微生物檢測(cè)。